羧胺三唑乳清酸盐对小鼠胶质瘤相关巨噬细胞系促癌表型的影响

目的 初步探索羧胺三唑乳清酸盐(CTO)对小鼠胶质瘤细胞系GL261和肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)系促癌表型的调控作用及其机制.方法 以GL261细胞培养上清诱导骨髓来源巨噬细胞(BMDM)或巨噬细胞系RAW264.7作为研究对象,用qPCR检测TAMs促癌介质mRNA水平;通过Seahorse细胞能量测定方法检测TAMs耗氧速率(OCR);用Western blot检测TAMs中低氧诱导因子?1α(HIF?1α)、低氧诱导因子?2α(HIF?2α)及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)共激活因子?1β(PGC?1β)蛋白水平.结果 CTO降低TAMs中IL?1β、IL?6、TNF?α 等经典活化巨噬细胞(M1)相关介质(P<0.001)及IL?10、Arg?1、TGF?β1等替代性活化巨噬细胞(M2)相关介质的mRNA水平(P<0.001);CTO显著下调TAMs中OCR(P<0.01);CTO下调TAMs中HIF?1α及HIF?2α蛋白水平(P<0.01),这一作用与促进线粒体耗氧的氧化磷酸化解偶联剂碳酰氰?4?三氟甲氧基苯腙(FCCP)作用相反;CTO显著降低TAMs中PGC?1β蛋白水平(P<0.001),这一作用与线粒体呼吸链抑制剂鱼藤酮(RTN)的作用一致.结论 CTO抑制氧化磷酸化下调PGC?1β表达,并且使HIF?1α及HIF?2α不稳定,从而影响TAMs中M1及M2表型的促癌介质生成.