高盐低pH值法优化多花黄精叶绿体DNA提取方法
Molecular Plant Breeding（2021）
摘要
本研究采用高盐低pH值法提取多花黄精叶绿体DNA(cpDNA),并通过L9(33)正交试验,以缓冲液中的NaCl浓度、叶片用量及去核离心力为考察因素,优化多花黄精cpDNA提取工艺,并设计核基因组及叶绿体基因组特异性引物,验证cpDNA质量.结果 表明,当NaCl浓度为1.50 mol/L,叶片用量为10 g,去核离心力为600×g时,以提取的cpDNA为模板,进行PCR扩增,能扩增出叶绿体基因片段且没有扩增出核基因片段,表明提取的cpDNA没有核基因组污染,质量好,产率高,能满足后续基因扩增等实验要求,该条件为本研究的最佳条件.该方法简便快速,对实验仪器要求不高,成本低,能够为黄精属植物cpDNA的提取提供参考.
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