膀胱癌微环境中轴突导向因子4D在肿瘤相关巨噬细胞表达的研究分析

目的 探讨膀胱癌微环境中轴突导向因子4D(semaphorins 4D,Sema4D)在肿瘤相关巨噬细胞(tu-mor-associated macrophages,TAM)上的表达特点.方法 膀胱癌细胞系T24与M0型巨噬细胞共培养,通过实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测不同表型巨噬细胞及共培养组巨噬细胞中Sema4D表达量;收集37例膀胱癌患者的临床资料、病理肿瘤组织和10例癌旁正常组织,应用免疫组化染色法和免疫荧光双标法检测CD163、Sema4D表达量,对TAM浸润性及其Sema4D表达率进行临床验证.结果 极化诱导以及共培养后,PCR结果显示M2型巨噬细胞中Sema4D的表达量明显高于M0和M1型巨噬细胞,差异均有统计学意义(P=0.0190,P=0.0180),T24+M0组巨噬细胞中Sema4D的表达量明显高于M0和M1型巨噬细胞,差异均有统计学意义(P=0.0066,P=0.0254);ELISA结果显示M2型巨噬细胞中Sema4D的表达量明显高于M0和M1型巨噬细胞,差异均有统计学意义(P=0.0052,P=0.0058),T24+M0组巨噬细胞培养上清液中Sema4D的表达量明显高于M0和M1型巨噬细胞,差异均有统计学意义(P=0.0026,P=0.0269).肿瘤组织中CD163+细胞计数高于癌旁正常组织(36.05±14.56 vs.12.10±5.70),差异有统计学意义(P<0.01);肿瘤组织中Sema4D表达高于癌旁正常组织(39.14±12.34 vs.11.00±4.65),差异有统计学意义(P<0.01),且肿瘤组织中Sema4D+TAM百分比高于癌旁正常组织(67.44±13.74 vs.21.04±1.80),差异有统计学意义(P<0.0001).肌层浸润性膀胱癌(muscle-invasive bladder cancer,MIBC)组织中CD163+细胞计数和Sema4D表达均高于癌旁正常组织(43.37±12.48 vs.28.33±11.98;48.78±10.18 vs.34.74±12.59),差异有统计学意义(P=0.0009,P=0.0258),且MIBC组织中Sema4D+TAM百分比高于非肌层浸润性膀胱癌(non-muscle-invasive blad-der cancer,NMIBC)组织(70.78±11.74 vs.60.58±12.05),差异有统计学意义(P=0.0160).TAM浸润性(CD163+细胞计数)及其Sema4D表达率与肿瘤T分期均呈正相关(P=0.0025,P=0.0201),与病理分级均呈正相关(P=0.0090,P=0.0031),但与患者性别、年龄和肿瘤最大直径均无相关性(P>0.05).结论 膀胱癌微环境中,M2型巨噬细胞表达Sema4D,可能导致膀胱癌增殖和侵袭.M2型巨噬细胞浸润性及其Sema4D表达率与膀胱癌发生和肌层浸润密切相关.