22种呼吸道病原体核酸多重联检试剂盒检测效能评估

目的 通过对1种新型呼吸道病原体核酸多重联检试剂盒检测效能评价,为新型冠状病毒(SARS-CoV-2)、流行性感冒(流感)病毒等叠加流行的大规模检测提供适宜技术方法.方法 收集北京地区急性呼吸道感染病例阳性标本252份,采用4种核酸检测试剂盒(3种核酸多重检测试剂盒A、B、C及1种SARS-CoV-2检测试剂盒D)分别进行荧光聚合酶链式反应(PCR)检测,评价其与临床标本检测结果的一致性.选取3份呼吸道病原体标本核酸,使用无核糖核酸(RNA)酶水10倍梯度稀释,并选取1份SARS-CoV-2阳性标本核酸稀释为10-1～10-6,评价A试剂盒的检出能力及批内重复性.结果 A、B、C试剂盒对甲型流感病毒、鼻病毒、腺病毒、肠道病毒、人偏肺病毒、副流感病毒3型、副流感病毒4型、冠状病毒NL63的检出率均为100％,Kappa值均为1,结果完全一致.对乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒1型、副流感病毒2型、冠状病毒OC43、冠状病毒229E、冠状病毒HKU1及肺炎支原体的Kappa值范围为0.91～1.3种核酸联检试剂盒对呼吸道病原体的最低检出限相当.A与D试剂盒对SARS-CoV-2的阴阳性符合率均为100％,批内重复性显示在稀释度10-1～10-3范围内,2种试剂各重复检测5次变异系数(CV)值均＜5％.在稀释度10-4～10-5范围内,A试剂对ORFlab基因检出率为40％,N基冈检出率为80％,D试剂对ORFlab基因检出率为30％,N基因检出率为20％.结论 A试剂盒与其他3种试剂盒对病毒载量较高的阳性标本检测的准确度无明显差异,检测性能相似;本研究为大规模核酸检测提供了检测试剂盒的多种选择.