Notch信号通路对急性B淋巴细胞白血病患者

[目的]观察急性B淋巴细胞白血病(B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)患者外周血Notch信号通路分子表达和CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)水平,评估Notch信号通路对B-ALL患者Treg活性的影响.[方法]入组31例B-ALL患者和20名对照者,分选血浆和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),纯化 CD4+CD25+CD127dim/-Treg.实时定量 PCR 法检测PBMC中Notch1～4、Hes1、Hes5 mRNA相对表达量,流式细胞术检测CD4+CD25+CD127dim/-Treg比例,酶联免疫吸附实验检测血浆白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)和IL-35水平.使用Notch信号通路抑制剂GSI刺激B-ALL患者分选的PBMC,检测细胞增殖、Treg比例、IL-10和IL-35表达变化.使用GSI刺激B-ALL患者纯化的Treg,与自体PBMC以1∶10比例共培养,检测细胞增殖、IL-10、IL-35、干扰素-γ 水平变化.两组间比较采用独立样本t检验或配对t检验.[结果]B-ALL患者PBMC中Notch受体(包括Notch1、Notch2、Notch3、Notch4)和Notch下游信号分子Hes1、Hes5 mRNA相对表达量均较对照者升高(P＜0.001).B-ALL 患者 CD4+CD25+CD127dim/-Treg 比例高于对照者(8.90％±2.41％vs 4.68％±1.01％,P＜0.001).B-ALL 患者外周血IL-10和IL-35水平均高于对照者(P＜0.05).GSI刺激后B-ALL患者PBMC增殖水平与无GSI刺激组差异无统计学意义(P=0.689),但GSI刺激后Treg比例和IL-10、IL-35水平均较无GSI刺激组降低(P＜0.05).使用GSI刺激Treg后与自体PBMC共培养,其抑制PBMC增殖的能力减弱(P＜0.001),IL-10和IL-35水平减少(P＜0.05),但干扰素-γ水平增加(P＜O.001).[结论]B-ALL患者外周血中Notch受体表达升高可能诱导CD4+CD25+CD127dim/-Treg数量增加和免疫抑制活性增强.