多重连接探针扩增结合熔解曲线法鉴别南、北板蓝根掺杂

目的 针对南、北板蓝根在市场流通和中医临床用药中混用现象,建立多重连接探针扩增结合熔解曲线法来快速准确地鉴别两者.方法 针对南、北板蓝根ITS2序列设计两对特异性探针,通过DNA变性、杂交、连接、扩增和进行熔解程序建立MLPA-熔解曲线,根据Tm值的差异进行鉴别,并对其探针特异性和检测灵敏度进行考察.结果 在特异性试验中,南板蓝根产生84.98℃的熔解曲线峰,北板蓝根产生83.35℃的熔解曲线峰;在灵敏度试验中,南板蓝根中掺杂10％的北板蓝根或北板蓝根中掺杂5％的南板蓝根均可被检出.26批商品药材中,有12批熔解曲线峰与北板蓝根相符,14批熔解曲线峰与南板蓝根吻合,与测序结果一致.结论 该方法灵敏准确,特异性强,可为南、北板蓝根的鉴别提供支持.