2株鸡源血清4型禽腺病毒的分离鉴定及致病性研究

为了解江苏东台地区4型禽腺病毒(FAdV-4)分离株的遗传进化情况及其致病性.本研究收集13份疑似患有心包积水-肝炎综合征病鸡的心脏、肝脏和脾脏等组织进行PCR鉴定,阳性样品分别接种鸡肝癌细胞系(LMH)进行病毒分离,对纯化后鉴定的FAdV-4 Hexon基因和Fiber2基因进行序列分析,并将FAdV-4肌肉接种SPF鸡进行动物回归实验.结果显示,13份样品中有9份PCR扩增出500 bp的FAdV Hexon基因条带;其中2份样品在接种细胞48 h～60 h后可见细胞变圆皱缩,形成典型的细胞病变并能稳定传代.Hexon基因同源性和遗传进化分析显示,2株分离株的同源性为99.9％,与SDNY1-15和PDS株的亲缘关系最近,且同源性分别为99.9％和100％;Fiber2全长基因的Alu酶谱分析显示2株病毒没有差异,均为致病性FAdV-4,将病毒分别命名为FAdV-4 DT和FAdV-4 AN.动物回归实验结果显示,DT和AN株对4周龄SPF鸡的致死率分别为50％和90％,剖检可见典型的心包积液,肝脏肿大出血;病理组织学观察可见,两株分离病毒均能致SPF鸡心肌水肿并伴有淋巴细胞浸润,肝脂肪变性、坏死、出血,肝细胞核内可见嗜碱性包涵体等特征性病变,与FAdV-4感染的病变一致;AN株感染后脏器病变比DT株严重.本研究对2株鸡源FAdV-4的鉴定为进一步探究其致病机理提供了实验基础.