利用酵母随机展示文库筛选与鉴定基因Ⅶ型新城疫病毒HN蛋白B细胞抗原表位

新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)给全世界家禽养殖业造成了严重的经济损失.HN蛋白是NDV上的重要囊膜蛋白,能诱导鸡体内的免疫系统产生保护性抗体.为了鉴定HN蛋白上的B细胞表位,本研究成功构建了基因Ⅶ型NDV HN蛋白的酵母随机展示文库,该文库的库容量为5×105 CFU,插入的片段随机分布.利用NDV高免血清标记HN蛋白的酵母随机展示文库,然后通过流式细胞分选技术分选阳性克隆细胞进行测序分析.结果 显示,阳性文库中150号多肽(GAPVHDPDYIGGIGKE)含量很高.对150号多肽进行截短分析,结果表明该多肽中VHDPDYIGGI序列为最小的B细胞表位,该表位能与感染NDV的高免血清普遍反应.因此,VHDPDYIGGI多肽是基因Ⅶ型NDV HN蛋白中广泛存在的B细胞表位.本研究结果为将来开发新城疫新型ELISA检测试剂盒以及表位疫苗奠定了基础.