A Versatile Synthetic Affinity Probe Reveals Inhibitory Synapse Ultrastructure and Brain Connectivity

Die Visualisierung von inhibitorischen Synapsen erfordert auf Sondentypen und das jeweilige bildgebende Verfahren abgestimmte Protokolle und beruht in der Regel auf genetischer Manipulation oder der Verwendung von Antikörpern, die bei Gewebefärbungen unter ihrer geringen Eindringtiefe leiden. Abgestimmt auf das Gephyrin Protein, einem universellen Marker der inhibitorischen Synapse, haben wir eine kompakte, hochaffine und hochselektive peptid-basierte Sonde entwickelt. Durch Anpassung der multivalenten Architektur und des Farbstoffs haben wir “Sylites” erhalten; eine Sonde die Färbungen mit hervorragendem Signal-zu-Hintergrund-Verhältnis ermöglicht, und die Antikörper bei der Anwendung im Gewebe aufgrund von schneller und effizienter Penetration, Minderung von Färbeartefakten und vereinfachter Handhabung deutlich übertrifft. In hochauflösenden Mikroskopieverfahren lokalisiert Sylite präzise die hemmende Synapse und ermöglicht so Messungen im Nanometermaßstab. Darüber hinaus zeigen wir, dass Sylite mit viralen Färbemethoden kombinierbar ist und dass auf diese Weise nicht nur die synaptische Konnektivität, sondern auch die Identität und Größe der hemmenden Postsynapsen aufgelöst werden kann.