甘蓝Ogura CMS育性恢复基因Rfo的传递效率解析及育种应用

为创制甘蓝Ogura细胞质雄性不育(CMS)育性恢复材料,在芥蓝和甘蓝型油菜远缘杂交后,采用甘蓝进行回交,构建BC4和BC5群体;基于Ogura CMS恢复基因Rfo编码区及其启动子序列,设计开发了适用于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的特异InDel分子标记Rfo-11F/Rfo-11R;利用该标记对BC4和BC5代群体进行Rfo基因分型.从8036株BC4回交后代中筛选获得Rfo基因阳性后代41株,平均Rfo白基因传递率为0.51％,平均花粉活力为81％.从BG代挑选5个重点Rfo阳性单株,细胞学观察结果显示5个单株的花粉母细胞染色体在减数分裂时期正常配对和分离的平均比例分别为84％和69％;进一步回交后,从15408株BC5回交后代中获得Rfo阳性后代117株,Rfo基因传递率为0.75％.平均花粉活力为83％,7个重点BC5代Rfo阳性单株的花粉母细胞染色体在减数分裂时期配对和分离正常的平均比例为81％和84％.经过5代回交,甘蓝Rfo育性恢复系的倍性全部回复为正常的二倍体.所有Rfo阳性单株开花后育性表现为可育,与Rfo基因的分子标记鉴定结果完全一致,由此表明,基于本研究中开发标记构建的快速、准确、高效的Rfo基因高通量分型体系,可用于进一步回交转育后代筛选,大大提高育种效率.