Performances du séquençage haut débit du TCR-bêta pour le diagnostic de lymphome T cutané

Le diagnostic précoce de lymphome T cutané n’est pas toujours aisé et repose sur un faisceau d’arguments cliniques, biologiques, histologiques et moléculaires. Le séquençage haut débit du TCR-bêta permet par la reconnaissance de séquences CDR3 spécifiques l’identification et la quantification de chaque clone T présent dans un échantillon donné. Il existe encore peu d’études à ce sujet avec des résultats discordants et aucun critère diagnostic validé. Notre étude avait comme but de déterminer pour cette technique des seuils optimaux pour les valeurs suivantes : fréquence du clone T majoritaire dans la peau rapportée à l’échantillon total (TCF) et ratio entre la fréquence du premier et du deuxième clone T (RPF), avec comme objectif de développer de nouveaux algorithmes pour le diagnostic de lymphome T cutané. Nous avons analysé rétrospectivement les données obtenues par le séquençage haut débit du TCR-beta dans des échantillons de biopsies cutanées réalisées chez 144 patients entre 2013 et 2020. Le diagnostic de lymphome T cutané était basé sur des critères internationaux validés. Nous avons inclus 101 échantillons de patients ayant un diagnostic de lymphome T confirmé dont 47 MF stade I-IIA, 1 stade IIB, 4 stade III, 35 syndromes de Sézary, 8 lymphomes T agressifs (PTCL NOS ou CD8+) et 6 lymphoproliférations CD30+ (3 papuloses lymphomatoïdes et 3 lymphomes anaplasiques à grandes cellules). En complément 43 échantillons provenant de patients avec des pathologies inflammatoires étaient inclus. Les performances de la technique ont été étudiées à l’aide de courbes ROC. Les meilleures performances diagnostiques étaient obtenues pour le TCF avec une AUC de 0,957 versus 0,929 pour le RPF. Les valeurs de TCF et RPF pour chaque catégorie ont été modélisées. Avec des seuils de TCF de 5 % et 25 %,la spécificité pour le diagnostic était de 95 % et 100 %, et la sensibilité de 89 % et 50 %. Il existait une corrélation significative entre le TCF et l’importance de l’atteinte sanguine chez les patients SS (cellules TCD4 + CD26−, r = 0,59, p = 0,0008 ; T CD4 + CD7−, r = 0,45, p = 0,01 ; T CD4 + CD158k+, r = 0,4, p = 0,03) Le TCF obtenu par HTS-TRB est un critère robuste pour le diagnostic de lymphome T cutané et particulièrement pour celui de MF, avec une sp de 95 % et une se de 89 % pour un seuil de 5 %. Une telle spécificité permettrait un diagnostic précoce de lymphome T cutané dans des cas difficiles. Ces résultats sont meilleurs que ceux obtenus à l’aide de la PCR classique sur gel du TCR gamma qui sont entachés de nombreux faux négatifs et faux positifs. Des études multicentriques prospectives seraient nécessaires pour la définition de critères validés internationaux pour l’usage de cette technique dans le diagnostic de lymphome T cutané.