Étude du lignage des cellules exprimant le facteur de transcription mésenchymateux profibrosant Prrx1 (Paired Related Homeobox protein 1) dans le poumon normal et de fibrose chez la souris

Introduction La fibrose pulmonaire idiopathique (FPI) est une pathologie fibrosante pulmonaire associee a des agressions repetees de l’epithelium alveolaire pulmonaire âge et la reactivation de voies de developpement embryonnaire, conduisant ainsi a la migration et l’accumulation de cellules mesenchymateuses, en particulier les myofibroblastes, aux sites de de lesion. Ainsi, PRRX1 est un facteur de transcription mesenchymateux retrouve augmente dans les fibroblastes de poumons de patients atteints de FPI, et dans le modele de fibrose pulmonaire murin apres instillation de bleomycine. Ce caractere profibrosant a ete confirme au laboratoire par l’utilisation d’un oligonucleotide anti-sens dirige contre Prrx1, induisant une diminution drastique des lesions fibrosantes induites par la bleomycine. L’objectif de ce projet est de determiner le lignage cellulaire des cellules exprimant Prrx1 afin de mieux comprendre leur origine et devenir au cours du developpement de la fibrose. Methodes Les souris Prrx1:CreERT2-IRES-GFP;Rosa26iTomato permettent de marquer de maniere inductible, par la proteine fluorescente tdTomato, les cellules exprimant Prrx1 en utilisant du tamoxifene. Un lobe est fixe pour realiser des immunohistochimies et le reste digere pour une etude ciblee par cytometrie en flux du lignage mesenchymateux (Tomatopos, CD45neg, EPCAMneg, CD31neg). Resultats Les premieres donnees de FACS ont mis en evidence une augmentation du nombre de cellules tdTomato-positives chez les souris instillees a la bleomycine, comparees aux souris naives avec une proportion importante de cellules mesenchymateuses. Sur les coupes de poumons, on retrouve egalement un marquage tdTomato-positif assez diffus, surtout dans les zones de fibrose, et aucun dans les souris naives. Conclusion Nos resultats suggerent que les cellules Prrx1 positives representent une population peu presente au niveau basal, qui va ensuite croitre et donner naissance essentiellement a des cellules mesenchymateuses lors du developpement de la fibrose.