LC-MS/MS法测定犬血浆中他喷他多并评价结合型代谢物对测定的影响

他喷他多为强中枢性镇痛药,在体循环中以非活性结合型代谢物为主.本文建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定犬血浆中他喷他多,并评价了结合型代谢物对测定的影响.血浆样品以甲醇沉淀蛋白处理,采用电喷雾电离源(ESI源),以多反应监测模式(MRM)检测.用于定量分析的离子对分别为m/z222μm/z 121(他喷他多)和m/z 264→m/z58(内标曲马多),同时监测他喷他多葡糖醛酸结合物(m/z 398→ m/z121)和硫酸结合物(m/z 302→m/z 222).实验中发现结合型代谢物易发生源内裂解,若不进行色谱分离,将严重影响他喷他多的测定.稳定性考察结果表明,犬血浆中的结合型代谢物于-20℃储存22天,未降解为他喷他多.测定犬血浆中他喷他多线性范围为0.100～20.0 ng·mL-1,定量下限为0.100 ng·mL-1.样品的日内精密度(RSD)小于3.4％,日间精密度(RSD)小于5.1％,准确度(RE)在-3.2％～0之间.本方法成功应用于他喷他多缓释片的比格犬药动学研究.