苹果坏死花叶病毒实时荧光定量PCR检测体系的建立
China Fruits（2021）
摘要
根据GenBank数据库已登录序列设计了12对苹果坏死花叶病毒(apple necrotic mosaic virus,ApNMV)的检测引物,通过引物筛选和体系优化,建立了以ApN1-F3/R3为引物的ApNMV的TB Green染料法实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测技术.该技术标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为97.3％,相关系数为0.997,灵敏度是常规PCR的100倍.采用qPCR方法对60份田间苹果样品进行检测,结果显示,常规PCR对ApNMV的检出率为51.7％,而qPCR的检出率为56.7％.该技术适用于田间样品的检测.
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