钙离子参与周期性高张应变和血小板源性微囊协同诱导的血管平滑肌细胞迁移

目的 探究周期性高张应变和血小板源性微囊(platelet-derived microvesicles,PMVs)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移功能的影响,以及Ca2+在其中的作用.方法 应用FX-5000T应变加载系统对体外培养VSMCs施加5％、15％幅度周期性张应变,分别模拟VSMCs受到生理、高血压条件下的周期性高张应变;使用划痕实验检测VSMCs迁移;使用无Ca2+培养基创造细胞外无游离Ca2+条件;应用IP3R拮抗剂2-APB阻断细胞内Ca2+释放;施加TRPV4通道拮抗剂GSK219和L型电压门控钙通道的抑制剂Nifedipine分别阻断相应Ca2+通道;体外施加凝血酶激活血小板产生PMVs以模拟高血压病理环境.结果 与5％周期性张应变相比,15％周期性张应变可以显著促进VSMCs迁移.去除细胞外Ca2+可以抑制VSMCs迁移,但GSK219和Nifedipine对于15％高张应变诱导的VSMCs迁移无显著作用;2-APB可以抑制15％高张应变诱导的VSMCs迁移过程.同时PMVs可以显著促进15％高张应变诱导的VSMCs迁移,并且细胞外和细胞内Ca2+均参与其中.结论 细胞内钙和细胞外钙在15％周期性高张应变诱导的VSMCs迁移中均发挥重要作用,并且PMVs可以协同参与到上述过程中.研究结果为高血压病理性张应变诱导血管重建的分子机制和临床治疗提供力学生物学新思路.