活血解毒方对缺氧/复氧所致心肌细胞凋亡的影响

目的 研究活血解毒方对缺氧/复氧(H/R)所致的心肌细胞凋亡的影响.方法 体外培养H9C2心肌细胞并分成正常对照组(Control组)、缺氧复氧组(H/R组)、H/R+活血解毒中药组、LY294002组和活血解毒中药+LY294002组,其中正常对照组给予DMEM培养基培养,缺氧复氧组给予缺氧4 h、复氧6 h处理,缺氧复氧+活血解毒中药组、LY294002组和活血解毒中药+LY294002组分别给予活血解毒中药、LY294002、活血解毒中药配合LY294002预处理24 h,然后均给予缺氧4 h、复氧6 h处理.采用CCK8检测各组心肌细胞的存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡水平,电镜观察各组心肌细胞中线粒体、自噬体的变化,Western Blot检测各组细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase3)、β-连环蛋白(β-Catenin)、p-p65、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白的表达.结果 活血解毒方预处理显著增加H/R诱导的H9C2心肌细胞凋亡,降低凋亡相关蛋白Cleaved caspase3、β-Catenin、p-p65表达,增加Bcl-2表达.结论 活血解毒方可通过抑制细胞凋亡,降低缺氧/复氧所致的心肌细胞损伤,其作用机制可能与PI3K信号通路相关.