miR-20a通过靶向NR4A3促进前列腺癌细胞增殖

前列腺癌是男性患者中常见的恶性肿瘤,探讨前列腺癌的发病机制和寻找合适的治疗靶标具有重要的临床意义.来源于类固醇核激素受体超家族NR4A3在多种肿瘤的恶性进展中发挥重要作用,但其在前列腺癌中的作用尚未阐明.本课题拟以前列腺癌细胞为研究对象,揭示NR4A3在前列腺癌中的作用;在此基础上,寻找靶向NR4A3的miRNA,为前列腺癌的诊断和治疗提供新靶点.GEPIA网站预测显示,NR4A3在前列腺癌组织中呈低表达.qRT-PCR检测证实,NR4A3在前列腺癌细胞中也呈低表达(P＜0.01);CCK8和克隆形成的结果显示,过表达NR4A3可使前列腺癌细胞活力显著下降(P＜0.01),集落数量和大小显著减少.生物信息学网站预测,NR4A3可能是miR-20a靶基因.通过qRT-PCR检测发现,miR-20a在前列腺癌细胞中呈高表达(P＜0.01),双荧光素酶报告基因结果证实,miR-20a能够与NR4A3的3'-UTR的2个位点靶向结合(P＜0.05,P＜0.001),且Western印迹结果显示,miR-20a可抑制NR4A3的表达;进一步CCK8检测发现,随着时间的延长miR-20a inhibitor能够使前列腺癌细胞活力显著下降(P＜0.05),miR-20a mimic则得到与之相反的结果(P＜0.05,P＜0.01);而当共转染miR-20a mimic和pcDNA3.1-NR4A3重组质粒时,通过CCK8和克隆形成实验发现,上调NR4A3的表达可部分抵消miR-20a mimic对PC3细胞活力(P＜0.05),集落数量和大小的促进作用.综上所述,miR-20a通过靶向NR4A3促进前列腺癌细胞增殖.