脐带间充质干细胞共培养对中性粒细胞存活和免疫功能的影响

目的 本文旨在通过模拟中性粒细胞在骨髓内的发育和生存环境,在体外建立一种延长中性粒细胞寿命和维持其生物学活性的方法.方法 建立间充质干细胞和人外周血中性粒细胞共培养体系,分别在共培养后的0d、1 d、2d、3 d收集中性粒细胞细胞,采用流式细胞术等技术检测其存活率,同时通过对中性粒细胞的趋化、吞噬、活性氧(reactive oxygen species,ROS)释放等功能进行分析,来明确共培养体系对中性粒细胞体外寿命和功能的影响;采用Western blot方法分析中性粒细胞中与细胞存活和凋亡相关的基因的表达情况.结果 间充质干细胞共培养可以促进中性粒细胞中Mcl-1基因的持续表达,并抑制Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3的剪切活化,从而影响细胞内源性和外源性凋亡途径,与对照相比,显著延长了中性粒细胞的寿命(P＜0.01);共培养体系培养3d后,中性粒细胞仍能保持较好的趋化运动能力、吞噬能力和ROS释放等功能,与对照组相比,两者之间有显著性差异(P＜0.01).结论 体外通过与间充质干细胞共培养,可以显著延长中性粒细胞寿命和维持其生物学功能,这为我们今后进一步优化中性粒细胞体外保存方法提供了理论和实验基础,同时也为提高粒细胞输注的有效性提供了新的思路.