黄连温胆汤含药血清干预IR-3T3-L1细胞的最佳浓度与时间筛选

目的:通过建立胰岛素抵抗3 T3-L1脂肪细胞模型,筛选黄连温胆汤含药血清最佳浓度和最佳作用时间.方法:制备黄连温胆汤含药血清及空白血清,诱导分化3 T3-L1脂肪细胞,应用地塞米松制备胰岛素抵抗3 T3-L1脂肪细胞模型,随机分为5组并给予相应处理干预12 h:模型组(8％空白血清)、中药高剂量组(8％含药血清)、中药中剂量组(4％含药血清)、中药低剂量组(2％含药血清)、二甲双胍组(1 mmol/L二甲双胍溶液),另外选用分化成熟的3 T3-L1细胞作为正常组(8％空白血清).CCK-8法测定细胞活力,葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖消耗量,ELISA法检测葡萄糖氧化酶含量;同样方法测定每组干预24 h和36 h各指标.结果:干预12 h、24 h时,中药高、中、低剂量组细胞活力相当,给药干预12 h,模型组葡萄糖消耗量明显低于其余5组(P<0.01),给药干预24 h,各组葡萄糖消耗量较12 h增高,但中药低剂量组与模型组无差异(P>0.05),余各组葡萄糖消耗量仍高于模型组(P<0.05);干预36 h时,中药高、低剂量组细胞活力较中药中剂量组有下降趋势,仅中药中剂量组和二甲双胍组葡萄糖消耗量较模型组升高(P<0.05),模型组培养基中GOD浓度低于中药中剂量组(P<0.05).结论:黄连温胆汤含药血清无细胞毒性,其调控IR-3 T3-L1脂肪细胞的最佳浓度是含药血清占培养体系的4％,最佳作用时间为36 h.