化痰祛湿活血方含药血清对HepG 2.2.15细胞乙型肝炎病毒复制能力及脂肪代谢相关基因表达的影响

目的 探讨化痰祛湿活血方治疗慢性乙型肝炎(CHB)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的可能作用机制.方法 60只SD大鼠随机分为恩替卡韦组、化痰祛湿活血方组、联合组和正常组,每组15只.恩替卡韦组给予恩替卡韦分散片0.5mg/ (kg-d)灌胃,化痰祛湿活血方组给予化痰祛湿活血方颗粒剂15g/ (kg·d)灌胃,联合组给予恩替卡韦分散片和化痰祛湿活血方颗粒剂灌胃,剂量同上,正常组给予正常饲料喂养,10天采血制备含药血清.细胞实验分为对照组、模型组、恩替卡韦血清组、化痰祛湿活血方血清组、联合血清组、激动剂组、联合+激动剂组,每组3个复孔.除对照组外,其余各组均用浓度50 μmol/L油酸处理HepG 2.2.15细胞建立CHB合并NAFLD细胞模型.造模后对照组和模型组给予10％正常大鼠血清,恩替卡韦血清组、化痰祛湿活血方血清组、联合血清组给予10％相应血清,激动剂组给予10％大鼠正常血清+T0901317,联合+激动剂组给予10％联合血清+T0901317.培养48 h后比较各组细胞活力、细胞凋亡率,检测细胞中肝X受体a (LXRa)、固醇调节元件结合蛋白1c (SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS) mRNA表达和细胞培养上清液中乙型肝炎病毒(HBV) DNA含量. 结果 模型组和对照细胞活力和细胞凋亡率差异无统计学意义(P＞0.05);与模型组比较,恩替卡韦血清组细胞活力升高、细胞凋亡率降低,而激动剂组细胞活力降低、细胞凋亡率升高(P＜0.01),化痰祛湿活血方血清组和联合血清组细胞凋亡率降低(P＜0.05或P＜0.01).与对照组比较,模型组LXRa mRNA降低、HBV DNA含量升高(P＜0.01);与模型组比较,化痰祛湿活血方血清组和联合血清组SREBP-1c mRNA降低,恩替卡韦血清组和联合血清组HBV DNA含量降低(P＜0.01);激动剂组LXRa、SREBP-1c、FAS mRNA和HBV DNA含量均高于联合血清组,而联合+激动剂组LXRa、SREBP-1c mRNA低于激动剂组(P＜0.01). 结论 化痰祛湿活血方可能通过调控脂代谢相关基因表达影响肝细胞内脂肪合成,从而增强恩替卡韦抑制HBV DNA复制能力.