基于线粒体自噬介导的凋亡探讨左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁证海马突触微环境损伤的保护作用

目的:基于线粒体自噬介导的凋亡探讨左归降糖解郁方(ZGF)对糖尿病并发抑郁症(DD)海马突触微环境损伤的保护作用.方法:建立DD大鼠动物模型及模拟DD环境的体外细胞模型,实验设正常组、模型组、GluR2阻断剂(CNQX)组和ZGF组.采用免疫荧光法检测GluR2、Parkin、Cyt-C、SYN及PSD-95蛋白表达;mRFP-GFP-LC3自噬双标法检测海马神经元自噬流;JC-1法检测线粒体膜电位;MitoSOX法检测线粒体活性氧(ROS);Tunel染色法检测海马神经元凋亡;ELISA法检测Glu、5-HT、DA、ATP水平;旷场试验和强迫游泳试验评估大鼠抑郁样行为;透射电子显微镜观察大鼠海马神经元自噬小体;Western blotting检测大鼠海马组织中GluR2、Parkin、Cyt-C蛋白表达.结果:ZGF能有效抑制体外海马神经元线粒体自噬流、线粒体ROS释放及海马神经元凋亡(P＜0.01),缓解线粒体膜电位下降、单胺神经递质失衡、突触前膜SYN及突触后膜PSD-95蛋白表达下调(P＜0.05,P＜0.01),同时改善DD大鼠抑郁样行为、线粒体自噬过度激活、单胺神经递质分泌不足,并显著调控GluR2-Parkin-Cyt-C信号通路相关蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:ZGF对线粒体自噬介导的海马神经元凋亡致DD海马突触微环境损伤具有明显的保护作用,这可能是其防治DD的重要机制.