新北美圣草苷对Aβ 25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制研究

目的:研究新北美圣草苷对淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ 25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用，探讨其防治AD的作用机制。 方法:采用MTT法检测新北美圣草苷对正常PC12细胞及Aβ 25-35损伤PC12细胞增殖的影响，筛选新北美圣草苷溶液的干预浓度。将PC12细胞按随机数字表法分为空白组、模型组、雌二醇组和新北美圣草苷组。空白组与模型组以DMEM培养24 h；雌二醇组加入DMEM和1×10 -3 μmol/L雌二醇溶液；北美圣草苷组加入DMEM和6×10 4 μmol/L新北美圣草苷溶液，培养2 h后，除空白组外，其余各组加入20 μmol/L的Aβ 25-35储备液，继续培养22 h。采用AnnexinV-FITC/PI双标记检测凋亡率，Western blot法检测雌激素受体β(estrogen receptor β, ERβ)及p-P38/P38蛋白表达，检测PC12细胞上清中乙酰胆碱(acetylcholine, ACh)含量及胆碱乙酰转移酶(Choline acetyl transferase, ChAT)、乙酰胆碱酯酶(Acetylcholin esterase, AChE)活性。 结果:与模型组比较，新北美圣草苷组细胞凋亡率[(8.080±0.578)%比(18.500±0.870)%]降低( P<0.01)，ERβ蛋白[(0.348±0.042)比(0.273±0.006)]表达升高( P<0.01)，p-P38/P38蛋白[(0.372±0.058)比(0.571±0.063)]表达降低( P<0.01)，ACh[(14.319±1.039)μg/mg比(9.157±1.605)μg/mg]水平及ChAT[(0.715±0.053)U/mg比(0.280±0.093)U/mg]活性增高( P<0.01)，AChE[(2.607±2.048)U/mg比(6.038±1.867)U/mg]活性降低( P<0.01)。 结论:新北美圣草苷可促进Aβ 25-35损伤的PC12细胞增殖，抑制细胞凋亡，具有一定的细胞保护作用，其作用机制可能与调节ERβ表达，抑制P38蛋白磷酸化，提高胆碱能系统功能有关。