响应面法优化多烯紫杉醇外泌体的载药工艺

目的 构建一种多烯紫杉醇的外泌体递药系统.方法 采用超速离心法提取A549肿瘤细胞外泌体,电穿孔法制备多烯紫杉醇外泌体(DTX-EXO).以包封率为考察指标,采用星点设计-响应面法考察制备工艺,动态透析法测定DTX-EXO的体外释药行为.以体外细胞摄取实验和体内小鼠活体成像实验考察外泌体的靶向性.结果 DTX-EXO的最优制备工艺参数为:多烯紫杉醇浓度120 μg·mL-1,电压0.75V,电击次数5次.透射电镜下DTX-EXO呈现杯碟状,平均粒径为151 nm.DTX-EXO在体外模拟正常体液环境和肿瘤环境下24 h累计释放度分别为40.5％和56.9％.细胞摄取实验中,香豆素-6(C6)-EXO组细胞摄取荧光强度高于C6组.小鼠活体成像实验中,生理盐水组在肿瘤部位没有荧光,Cy5.5-N-羟基琥珀酰亚胺脂(Cy5.5)-DTX-EXO组在肿瘤部位的荧光最强,Cy5.5-EXO组次之,Cy5.5-DTX组最弱.结论 外泌体可以用于多烯紫杉醇的传递载体,并且具有良好的缓释性和靶向性.