miR-140-5 p通过调控Wnt1通路对非小细胞肺癌迁移与侵袭能力的影响

目的:探究miR-140-5p通过Wnt1通路对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移、侵袭的影响,为临床对NSCLC的治疗提供理论依据.方法:临床收集人NSCLC组织及癌旁组织20组,RT-PCR检测miR-140-5p与Wnt1基因的表达水平,Spearman相关分析法比较miR-140-5p与Wnt1基因表达水平的相关性.将miR-140-5p mimic转染至A549细胞,通过RT-PCR确认过表达.将A549细胞分为对照组、miR-140-5p组、Wnt1组和mimic+Wnt1组,将miR-140-5p mimic和Lv-Wnt1载体分别或共转染至A549细胞,分别通过RT-PCR、Western blot检测Wnt1基因表达水平,并通过细胞划痕实验和Transwell检测各组A549细胞的迁移、侵袭能力.Western blot检测各组细胞中MMP2,MMP9和β-catenin蛋白表达水平.荧光素酶报告基因法验证miR-140-5p与Wnt1基因的靶向关系.结果:与癌旁组织相比,NSCLC组织中miR-140-5p表达量显著降低(P<0.01),且miR-140-5p与Wnt1基因表达水平呈负相关(r=-0.901,P<0.001).过表达miR-140-5p后,与对照组相比,miR-140-5p组中Wnt1基因在RNA和蛋白质水平的表达量、细胞迁移能力、细胞侵袭数量、MMP2,MMP9、β-catenin蛋白表达量均显著下降(P<0.01),而在Wnt1组中均显著升高(P<0.01).与Wnt1组相比,mimic+Wnt1组中Wnt1基因在RNA和蛋白质水平表达量、细胞迁移能力、细胞侵袭数量、MMP2、MMP9、β-catenin蛋白表达量均显著下降(P<0.01).在荧光素酶报告实验中,与WT-Wnt1+miR-140-5p NC组相比,WT-Wnt1+miR-140-5p mimic组中荧光素酶活性显著降低(P<0.01).结论:miR-140-5p可靶向作用于Wnt1基因,抑制Wnt1通路活性并下调MMP2,MMP9、β-catenin表达,抑制NSCLC细胞迁移与侵袭.