I型干扰素诱导表达的三基序蛋白22引发线粒体交联促进心肌细胞凋亡

目的:研究三基序蛋白22(TRIM22)在I型干扰素(Interferon,IFN)致人心肌细胞凋亡中的作用及机制.方法:用不同浓度的IFN-α刺激心肌细胞,流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况.经实时荧光定量PCR(realtime PCR)检测IFN-α刺激心肌细胞后,不同时间点TRIM22 mRNA的表达水平,以及TRIM22 mRNA和蛋白表达水平与IFN-α的剂量依赖性关系.在心肌细胞中过表达TRIM22,通过流式细胞术和激光共聚焦检测细胞凋亡情况.通过核酸染料4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)或线粒体深红色荧光探针染色,经激光共聚焦观察TRIM22与线粒体的共定位情况及对线粒体的影响.结果:流式细胞术检测发现IFN-α可诱导心肌细胞凋亡,且呈剂量依赖性(P<0.05).realtime PCR检测发现,IFN-α刺激心肌细胞6 h后TRIM22 mRNA表达显著上调,12 h达最高,随后逐渐下降(P<0.05).同时IFN-α刺激心肌细胞TRIM22 mRNA和蛋白表达水平升高,且呈剂量依赖性(P<0.05).激光共聚焦检测发现TRIM22-增强绿色荧光蛋白(EGFP)以团块状分布在胞浆和胞核中;TRIM22与线粒体存在共定位关系,TRIM22能够引发线粒体交联,导致心肌细胞凋亡小体出现.结论:IFN-α可刺激心肌细胞高表达TRIM22引发线粒体交联,加速细胞凋亡.