非红细胞血影蛋白-β2在肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌细胞迁移、增殖、侵袭的影响

Chinese Journal of Experimental Surgery(2021)

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摘要
目的:探讨非红细胞血影蛋白-β2(SPTBN2)在肺腺癌(LUAD)组织中的表达水平及其对肺腺癌细胞体外迁移、增殖、侵袭的影响。方法:通过基因表达数据库(GEO)下载的3个肺腺癌数据集验证SPTBN2在肺腺癌与正常肺组织中的差异表达。通过癌症基因组图谱(TCGA)分析SPTBN2在肺腺癌(LUAD)患者的预后中所起到的作用。收集2019年7月至2020年9月在郑州大学第一附属医院胸外科经手术证实为肺腺癌患者40例,收取癌组织标本及相应的癌旁组织标本,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肺腺癌组织和癌旁组织中SPTBN2的mRNA表达水平。选择人肺腺癌细胞系A549按实验转染方案随机分组,分为空白(Blank)组、沉默SPTBN2 (si-SPTBN2)阴性对照(NC)组、si-SPTBN2组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖能力;采用划痕实验及Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力。计量资料组间比较采用 t检验。 结果:分析GSE10072( t=7.552, P<0.01),GSE19188( t=8.059, P<0.01)和GSE32863( t=9.196, P<0.01)数据集,SPTBN2在肺腺癌组织中的表达水平明显高于正常肺组织。TCGA数据库KM-PLOTTER生存分析网站进行生物信息学分析,显示SPTBN2高表达是肺腺癌患者预后的危险因素( P<0.01)。实时荧光定量RT-qPCR检测肺腺癌组织中SPTBN2的表达(7.922±0.956)高于正常肺组织(5.726±1.343, t=3.766, P<0.01),差异有统计学意义。CCK-8结果显示敲低si-SPTBN2实验组的细胞增殖能力明显低于si-SPTBN2 NC对照组(24 h:0.439±0.011比0.495±0.007, t=7.974, P<0.01;48 h:0.509±0.022比0.659±0.023, t=9.577, P<0.01;72 h:0.917±0.033比1.687±0.027, t=34.320, P<0.01;96 h:1.294±0.749比2.930±0.059, t=3.660, P<0.01)。划痕实验结果显示,si-SPTBN2的实验组在划痕48 h后相较于对照组迁移距离更短[划痕愈合比:(36.56±3.02)%比(51.94±5.72)%, P<0.01]。Transwell迁移、侵袭实验结果表明,敲低SPTBN2可使肺腺癌细胞的迁移能力显著低于对照组[(362±18)个比(977±25)个, t=35.750, P<0.01],侵袭能力显著低于对照组[(152±9)个比(770±34)个, t=43.920, P<0.01],差异均有统计学意义。 结论:SPTBN2在肺腺癌中高表达,与不良预后相关,具有促进肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用。
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关键词
Lung adenocarcinoma,Migration,Proliferation,Invasion
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