高糖通过白介素1β促进1型糖尿病大鼠原代主动脉平滑肌细胞迁移参与内膜新生的研究

目的 探讨在动脉损伤后内膜新生中高糖促进血管平滑肌迁移的机制.方法 采用组织块贴壁法分离大鼠原代主动脉平滑肌细胞,免疫荧光染色法进行细胞鉴定.大鼠原代主动脉平滑肌细胞分为正常对照组(Con)、高糖组(HG)、HG+半胱氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)抑制剂组(HG+VX-765)、Con+Caspase-1抑制剂组(VX-765).大鼠随机分别为假手术组(C)、正常颈动脉球囊损伤组(I)、糖尿病假手术组(DM)、糖尿病球囊损伤组(DMI).RT-PCR检测含NLR家族pyrin域蛋白3(NLRP3)、Caspase-1、消皮素D(GSDMD)、IL-1βmRNA水平表达.术后24 h并2周后免疫荧光染色法检测IL-1β表达,HE染色检测血管损伤后内膜新生情况,ELISA法检测IL-1β水平,划痕实验测定平滑肌细胞迁移能力.结果 分离的细胞经免疫荧光染色确定为大鼠原代主动脉平滑细胞.与Con组比较,HG组IL-1β 水平、细胞迁移率、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1βmRNA表达水平升高(P<0.05或P<0.01).与HG组比较,HG+VX-765组IL-1β 水平、细胞迁移率降低(P<0.05或P<0.01).24 h和2周后,与C组比较,DM组IL-1β表达水平、内膜面积/中膜面积升高(P<0.05或P<0.01);与I组比较,DMI组IL-1β表达升高(P<0.01).结论 高糖诱导细胞焦亡分泌的IL-1β促进大鼠原代主动脉平滑肌细胞迁移,参与动脉损伤后的内膜新生过程.