肠源反应性关节炎中HLA-B27表达情况及其与肠道细菌相互作用机制研究

目的 探讨HLA-B27与反应性关节炎患者肠道沙门氏菌(S.enteritidis)胞内清除、复制、运输的机制情况.方法 采用共聚焦显微镜、流式细胞术、夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)评估相关蛋白的定位,评估肠杆菌在细胞内的转运,并测量相关细胞因子的产生.结果 通过基因检测后发现,与对照组比较,病例组HLA-B27表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);HLA-B27+/ReA+处理的细胞中细菌数量多于HLA-B27-/ReA-细胞.与HLA-B27-/ReA-细胞相比,HLA-B27+/ReA+细胞清除细胞内细菌较少(分别在4 h、24 h、72 h时,P<0.05);在感染后24 h、72 h、7 d,HLA-B27细胞中含有肠炎的细胞比HLA-A2细胞中明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);通过ELISA法检测肠炎感染后不同组的TNF-α 和IL-10的表达情况发现,与HLA-B27-/ReA-细胞比较,HLA-B27+/ReA+细胞TNF-α 的含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);而IL-10的表达情况同样在24 h后明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);在HLA-B27细胞和HLA-A2细胞中,含有吞噬体的肠内菌体均可表达LAMP1和LAMP2.感染后30 min～24 h内,60％以上的含有GFP-S的吞噬体中检测到LAMP1和LAMP2;在感染后30 min和24 h,在HLA-B27细胞和HLA-A2细胞中仅检测到12％～17％的含有肠杆菌素的液泡中的转铁蛋白.低于20％的HLA-B27阳性转染细胞与30 min和24 h的对照细胞中发现了含有细菌的吞噬体和内吞标志物.结论 反应性关节炎患者中HLA-B27呈阳性且其可能通过影响肠道细菌的存活及转运进行影响疾病的发生、发展.