过表达PLAC1基因对子宫颈癌HeLa细胞侵袭和转移能力影响

目的 探讨过表达PLAC1基因对子宫颈癌H eLa细胞侵袭和转移能力影响.方法 通过慢病毒感染技术构建稳定过表达PLAC1基因的HeLa细胞株,Transwell实验和划痕实验评估细胞的侵袭和迁移能力,蛋白质印迹法检测Slug、Snail、vimentin、p65和基质金属蛋白酶2(MMP2)等肿瘤相关分子表达水平,对癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合(GEO)数据库中宫颈癌RNA-Seq数据和相关临床资料进行分析,探讨PLAC1表达情况与宫颈癌患者生存预后关系.结果 HeLaPLAC1组细胞迁移数为(179.40±31.86)个,多于HeLaVector组的(103.2±8.17)个,t=5.968,P<0.001;侵袭数为(170.00±49.10)个,多于HeLaVector组的(87.40±13.90)个,t=2.352,P=0.047.在细胞划痕实验中,HeLaPLAC1组迁移率为(35.29±1.94)％,高于HeLaVector组的(21.56±2.44)％,t=8.809,P<0.001.HeLaPLAC1组Slug表达量为5.42±1.24,高于HeLaVector组的0.42±0.08,t=11.764,P<0.001;HeLaPLAC1组Snail表达量为0.72±0.02,高于HeLaVector组的0.67±0.03,t=3.107,P=0.038;HeLaPLAC1组p65表达量为0.80±0.03,低于HeLaVector组的0.97±0.02,t=8.709,P=0.003;HeLaPLAC1组p-p65表达量为0.82±0.05,低于HeLaVector组的1.00±0.05,t=4.510,P=0.011;HeLaPLAC1组MMP2表达量为0.95±0.03,高于HeLaVector组的0.85±0.03,t=4.984,P=0.008;HeLaPLAC1组vi-mentin表达量为3.42±1.28,高于HeLaVector组0.32±0.07,t=7.962,P<0.001.MS751shPLAC1-1组Slug表达量为0.61±0.11,低于MS751shNC组的0.90±0.10,t=10.887,P<0.001;MS751shPLAC1-1组Snail表达量为0.92±0.03,高于MS751shNC组的0.48±0.02,t=19.730,P<0.001;MS751shPLAC1-1组p65表达量为0.93±0.03,高于MS751shNC组的0.66±0.01,t=13.235,P=0.003;MS751shPLAC1-1组p-p65表达量为0.91±0.02,高于MS751shNC组的0.53±0.02,t=26.856,P<0.001;MS751shPLAC1-1组MMP2表达量为0.79±0.01,低于MS751shNC组的0.88±0.01,t=10.246,P=0.001;MS751shPLAC1-1组vimentin表达量为0.64±0.08,低于MS751shNC组的0.88±0.07,t=8.111,P=0.001;MS751shPLAC1-2组Slug表达量为0.66±0.10,低于MS751shNC组的0.90±0.10,t=5.259,P=0.006;MS751shPLAC1-2组Snail表达量为1.25±0.11,高于MS751shNC组的0.48±0.002,t=12.506,P=0.005;MS751shPLAC1-2组p-p65表达量为0.94±0.01,高于MS751shNC组的0.53±0.02,t=38.408,P<0.001;MS751shPLAC1-2组MMP2表达量为0.76±0.01,低于MS751shNC组的0.88±0.01,t=8.906,P=0.002;MS751shPLAC1-2组vimentin表达量为0.60±0.10,低于MS751shNC组的0.88±0.07,t=7.785,P=0.002.在TCGA-CESA数据中,肿瘤组PLAC1中位表达量为37.63,高表达组和低表达组中位生存时间分别为27.9(0.75～531.25)和40.33(0.17～534)个月,差异有统计学意义,χ2=5.160,P=0.015.结论 过表达PLAC1基因通过上调Slug和vimentin表达增强HeLa细胞侵袭、迁移能力,且PLAC1高表达是宫颈癌患者不良生存预后的独立危险因素.