卡培他滨节拍化疗联合依西美坦通过PI3K-AKT信号通路抑制乳腺癌细胞增殖的实验研究

目的:探讨卡培他滨节拍化疗联合依西美坦对乳腺癌MCF-7细胞增殖及PI3K-AKT信号通路的影响。方法:体外培养MCF-7细胞，分为对照组（加入不含药物的DMEM培养液）、30 μmol/L依西美坦组和卡培他滨节拍化疗联合用药组[30 μmol/L依西美坦联合不同浓度（50、33、17 μmol/L）卡培他滨]。CCK-8法检测细胞增殖抑制率，计算药物半数抑制浓度（ IC50）。流式细胞术检测各组细胞周期与细胞凋亡率的变化。蛋白质印迹法检测MCF-7细胞PI3K-AKT信号通路中相关蛋白的表达。 结果:卡培他滨和依西美坦作用MCF-7细胞72 h的 IC50分别为101.2 μmol/L和60.6 μmol/L。24、48 h 30 μmol/L依西美坦联合50、33、17 μmol/L卡培他滨组MCF-7细胞增殖抑制率均高于30 μmol/L依西美坦组（均 P<0.01）；30 μmol/L依西美坦组、30 μmol/L依西美坦+50 μmol/L卡培他滨组、30 μmol/L依西美坦+33 μmol/L卡培他滨组、30 μmol/L依西美坦+17 μmol/L卡培他滨组细胞凋亡率分别为（18.1±2.6）%、（34.6±3.0）%、（27.6±1.3）%、（23.1±1.6）%，差异有统计学意义（ F=23.652， P<0.01）。与对照组相比，30 μmol/L依西美坦组MCF-7细胞G 2期细胞比例上升[（16.7±2.6）%比（10.6±2.2）%]，G 1期细胞比例下降[（53.3±4.0）%比（56.3±3.2）%]；30 μmol/L依西美坦+50 μmol/L卡培他滨组MCF-7细胞S期细胞比例上升[（39.0±3.6）%比（33.1±2.0）%]；30 μmol/L依西美坦+33 μmol/L卡培他滨组MCF-7细胞更多停滞于S期[（51.7±4.1）%]，G 2期细胞几乎消失[（1.2±0.5）%]；30 μmol/L依西美坦+17 μmol/L卡培他滨组MCF-7细胞G 2期细胞比例上升[（26.2±3.1）%]。蛋白质印迹法检测显示，低剂量节拍化疗促进依西美坦抑制PI3K表达，促进AKT蛋白473位丝氨酸磷酸化[p-AKT（473）表达增高]，促进信号通路下游S6蛋白表达及提高磷酸化水平（p-S6表达升高），从而激活凋亡信号。 结论:卡培他滨节拍化疗联合依西美坦可协同抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖，通过影响PI3K-AKT信号通路激活细胞凋亡机制。