熊果酸通过下调MyD88抑制结肠癌细胞侵袭转移的作用机制研究

目的 探讨熊果酸通过下调MyD88抑制结肠癌细胞侵袭转移的作用及可能的机制.方法 在细胞增殖实验中以人结肠癌HCT-116细胞和人结肠癌Lovo细胞作为本次研究对象,分为对照组、熊果酸组,熊果酸组给予不同的熊果酸药物浓度处理,继续培养48 h后再应用CCK-8法检测其增殖曲线;细胞凋亡实验则将人结肠癌HCT-116细胞分为对照组、熊果酸组,熊果酸组予以20 μmol/L的浓度处理48 h,收集细胞后应用流式细胞术检测其凋亡水平.后期的侵袭转移及机制研究包括2部分,一部分为HCT-116细胞为研究对象,分组及处理方法同前;另一部分以MyD88稳转人结肠癌HCT-116细胞为研究对象进行实验,分为MyD88-NC组、MyD88-KD组、MyD88-OE组.划痕实验则分别于0、48 h观察各组HCT-116细胞的迁移情况,比较细胞迁移能力;Transwell实验分别观察0、24 h各组HCT-116细胞的迁移情况,比较细胞迁移能力;蛋白质印迹法检测上述各组细胞的MyD88、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达水平差异.结果 熊果酸可以显著抑制结肠癌细胞的增殖,且呈明显的剂量依赖性;熊果酸可以显著促进结肠癌细胞的凋亡,对照组相比差异有统计学意义(P=0.02).MyD88-KD组的迁移率(划痕实验、Transwell实验)明显低于对照组(P=0.04,P=0.03),而MyD88-OE组的迁移率(划痕实验、Transwell实验)则显著高于对照组,两者差异均有统计学意义(P=0.004,P=0.002);熊果酸组的迁移率也显著低于对照组,两者差异有统计学意义(P=0.009);MyD88-KD组及熊果酸组MMP-2、MMP-9的蛋白表达均明显降低,而MyD88-OE组则明显升高,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 熊果酸可显著降低MyD88蛋白的表达,并通过对MMP-2和MMP-9蛋白表达的下调实现对人结肠癌细胞侵袭转移能力的抑制作用.