人源IL-15转基因NCG小鼠在CAR-NK细胞肿瘤治疗临床前评价中的应用

目的:探讨人源IL-15转基因NCG小鼠(NCG-hIL-15鼠)在CAR-NK细胞肿瘤治疗临床前评价中的作用.方法:通过qPCR结合WB法检测NCG-hIL-15鼠骨髓及主要器官(脾、肝、肺、肾和胰)中的表达丰度.将人PBMC来源的NK(PB-NK)细胞回输到NCG-hIL-15鼠及对照NCG鼠,监测NK细胞的体内扩增与受体鼠的体质量、生存期变化,流式细胞术检测体内扩增NK细胞的活化受体与抑制受体表达差异,WB法检测穿孔素与颗粒酶B的表达.MIAPaca-2细胞原位荷瘤NCG-hIL-15鼠或NCG鼠用anti-MUC 1-CAR-NK细胞回输治疗,流式细胞术检测CAR-NK细胞在不同组鼠体内的存活情况,小动物活体成像术检测肿瘤生长并记录荷瘤鼠生存期.结果:NCG-hIL-15鼠中PB-NK细胞可以在10周内稳定增殖,且观察期内未发生显著的移植物抗宿主反应.NCG-hIL-15鼠中扩增NK细胞的KAR与KIR丰度与原始细胞相比差异较小;与NCG鼠体内增殖的NK细胞相比,NCG-hIL-15鼠体内扩增的NK细胞有更高水平的穿孔素与颗粒酶B表达(均P＜0.05).CAR-NK细胞在NCG-hIL-15鼠体内存活比显著增加、抑瘤效果增强,与对照组相比NCG-hIL-15鼠生存期显著延长(均P＜0.01).结论:NCG-hIL-15鼠模型可用于基于NK细胞免疫疗法的临床前实验与生物学评价.