黄芪活性多糖APS-Ⅱ的酸降解及其降解寡糖的结构和免疫活性研究

课题组前期研究发现黄芪免疫活性多糖APS-Ⅱ具有较强的免疫活性,鉴于其分子量较大且结构复杂,本文旨在建立APS-Ⅱ酸降解的最优方法,对降解产物进行结构初探与分离制备以后,通过体外免疫细胞实验筛选免疫活性最强的寡糖活性中心.本研究以APS-Ⅱ为研究对象,采用"自上而下"的研究策略,首先通过单因素试验和正交试验优化了APS-Ⅱ酸降解的最佳条件,接着以最佳条件制备的黄芪寡糖通过亲水作用色谱-电喷雾电离源-高分辨飞行时间质谱进行结构解析,然后将黄芪寡糖通过纯化制备色谱仪分离制备不同聚合度的寡糖片段,最后利用体外免疫细胞从多角度筛选免疫活性中心片段.结果 表明APS-Ⅱ的最佳酸解条件为水解温度80℃,三氟乙酸浓度1.0 mol·L-1,水解时间1 h;该降解条件具有良好的重复性;降解产物黄芪寡糖含有主链1→4连接的六碳醛聚糖结构;6个寡糖片段的免疫活性筛选实验表明分子量较大的寡糖具有更强的免疫促进作用,推测黄芪寡糖的免疫活性中心位于聚合度DP9～DP19的糖链中.动物福利和实验过程均遵循山西大学动物伦理委员会的规定.该结果对其他中药寡糖的研究具有一定示范作用,为黄芪寡糖的结构表征及构效关系研究奠定基础,同时可以促进黄芪寡糖药物的开发.