硅酸二钙对人牙髓干细胞增殖及骨向分化的影响

目的:探索硅酸二钙(Dicalcium silicate,C2S)在人牙髓干细胞增殖和成骨向分化能力方面的影响.方法:配制含梯度浓度(1、5、10、50、100μg/mL)的C2S条件培养基,与人牙髓干细胞共培养1、3、5、7天,CCK-8实验及迁移实验分别用于检测C2S对人牙髓干细胞的增殖能力与迁移能力的影响.筛选出最佳浓度为50μg/mL的C2S溶液与人牙髓干细胞共培养,并诱导其骨向分化.通过碱性磷酸酶(Alkaline phospha-tase,ALP)染色及定量试剂盒,茜素红染色及定量分别检测ALP活性与矿化结节沉积,RT-PCR实验与Western Blot实验检测骨向分化相关mRNA与蛋白表达水平来进一步研究人牙髓干细胞在C2S作用下体外骨向分化能力的改变.结果:50 μ g/mL的C2S溶液可显著提高人牙髓干细胞的增殖能力、ALP活性与体外矿化能力.同时C2S能促进ALP、RUNX2、OPN的RNA表达水平及蛋白水平的升高.结论:50μg/mL的C2S溶液能够显著提升人牙髓干细胞的增殖能力和体外骨向分化的能力.