TLR3激动剂对体外NK细胞抗肿瘤活性的影响及机制

目的 探讨TLR3激动剂Poly(I:C)转染对体外扩增的人自然杀伤(NK)细胞抗肿瘤活性的影响及可能机制.方法 将体外扩增的人NK细胞分为Poly-NKelect.组[人NK细胞经电穿孔转染Poly(I:C)]、Poly-NK组[脂质体介导的Poly(I:C)并转染人NK细胞]以及NK组(单独NK细胞),采用CCK-8法检查3组细胞对人结直肠癌细胞株DLD-1细胞的杀伤率;根据实验结果选择Poly-NK组细胞进行后续实验,Poly-NK组细胞经TLR3/dsRNA复合物抑制剂处理(Poly-NKinhib.组)及TLR3下游的TBK1/IKKε复合物抑制剂BX795处理(Poly-NK+BX组),采用CCK-8法检测这两组细胞对DLD-1细胞的杀伤率,流式细胞仪检测这两组NK细胞活化标志物CD69的表达,ELISA检测干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及穿孔素(perforin)的表达水平.结果 与NK组比较,Poly-NKelect.组和Poly-NK组对DLD-1细胞的杀伤率增加(P<0.05);与Poly-NKelect.组比较,Poly-NK组对DLD-1细胞的杀伤率更高(P<0.01),因此后续试验均采用Poly-NK组进行比较;与Poly-NK组比较,Poly-NK+BX组对DLD-1细胞的杀伤率降低(P<0.01)、CD69表达降低(P<0.05)、perforin及IFN-γ表达降低(P<0.05);与Poly-NK组相比,Poly-NKinhib.组对DLD-1细胞的杀伤率降低(P<0.05)、CD69的表达下降(P<0.05)、TNF-α及IFN-γ的表达降低(P<0.05).结论 Poly(I:C)可促进人NK细胞的体外抗肿瘤活性,TBK1/IKKε激酶复合体可能参与了Poly(I:C)对人NK细胞的活化.