OGG1与Smad7蛋白相互作用的具体区域鉴定

目的 体外探究8-氧鸟嘌呤DNA糖化酶1(OGG1)蛋白和Smad家族成员7(Smad7)蛋白相互作用的具体区域.方法 利用原核表达系统表达OGG1和Smad7的蛋白截段体,通过GST蛋白纯化和pull-down实验验证两个蛋白不同截段体间的相互作用.结果 将OGG1与Smad7进行pull-down实验,发现两者存在相互作用.将含有1-346个氨基酸(1-346 aa)全长片段的OGG1及其截段体1-242 aa、1-138 aa、1-63 aa和34-346 aa,与Smad7全长(1-428 aa)进行pull-down实验,发现OGG1全长(1-346 aa)及其截段域(34-346 aa)与Smad7具有相互作用.将OGG1截段域(34-346 aa)与Smad7全长(1-428 aa)及其截段体1-308 aa、1-240 aa和1-128 aa进行pull-down实验,发现只有Smad7截段体1-128 aa与OGG1截段体34-346 aa不存在相互作用.结论 初步判断OGG1(34-346 aa)和Smad7(128-240 aa)可能为OGG1与Smad7发生相互作用的区域.