缺氧诱导因子-1α对肺癌细胞凋亡、增殖的影响及与Livin、Caspase-3表达的相关性

目的 研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对人肺腺癌A549细胞株及人小细胞肺癌H446细胞株的凋亡、增殖的影响,以及HIF-1α表达与Livin、Caspase-3表达的关系.方法 常规培养A549、H446细胞,转染含有HIF-1α基因的质粒过表达HIF-1α基因,筛选干扰序列干扰HIF-1α基因表达,将对数生长期细胞随机分成对照组、HIF-1α过表达组和HIF-1α干扰组.应用Annexin V-PI凋亡检测试剂盒及流式细胞仪检测细胞凋亡;应用Transwell小室检测细胞迁移及侵袭;Real-time PCR及Western Blot检测Livin、Caspase-3表达.结果 A549细胞HIF-1α过表达组较对照组凋亡显著减少(P<0.01),迁移及侵袭细胞数明显增多(P<0.05),Livin mRNA表达显著增多(P<0.01),Caspase-3 mRNA及蛋白表达明显减少(P<0.05),Livin蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);A549细胞HIF-1α干扰组较对照组晚期凋亡细胞明显增多(P<0.05),迁移及侵袭细胞数均显著减少(P<0.01),Livin在mRNA和蛋白水平表达明显减少(P<0.05),Caspase-3 mRNA及蛋白表达显著增多(P<0.01);H446细胞HIF-1α过表达组与对照组比较,细胞凋亡、侵袭以及Caspase-3 mRNA表达均无统计学差异(P>0.05),细胞迁移明显增多(P<0.05),Livin在mRNA和蛋白水平表达均显著增多(P<0.01),Caspase-3蛋白表达明显减少(P<0.05);H446细胞HIF-1α干扰组较对照组凋亡显著增多,迁移及侵袭细胞数均显著减少(P<0.01),Livin蛋白表达显著减少,Caspase-3在mRNA及蛋白水平表达显著增多(P<0.01);Livin mRNA表达减少无统计学意义(P>0.05).结论 抑制HIF-1α表达均可通过增加凋亡、减少迁移与侵袭达到抑制肺癌肿瘤进展的效果,在理论上证实HIF-1α可以作为肺癌治疗靶点;肺癌细胞中HIF-1α与Livin的表达呈正相关,Caspase-3与HIF-1α、Livin的表达呈负相关,可能是通过抑制HIF-1α 以上调Livin、下调Caspase-3表达作为肺癌治疗的靶点.