VPS4B在克罗恩病发病中的作用机制研究

目的:研究空泡蛋白分选4B(vacuolar protein sorting 4B,VPS4B)在克罗恩病(Crohn′s disease,CD)患者肠黏膜中的表达、作用机制及其临床意义.方法:收集南通市第二人民医院2014年1月—2019年12月CD患者肠黏膜及健康人群肠黏膜石蜡标本各10例,采用免疫组化、蛋白质免疫印迹(Western Blot)检测CD及正常人群肠黏膜活检组织中VPS4B的表达及定位.用三硝基苯磺酸(trinitrobenzenesulphonic acid,TNBS)灌肠构建小鼠结肠炎模型,用Western Blot检测VPS4B、凋亡指标active caspase-3、裂解多聚(ADP-核糖)聚合酶[cleaved poly(ADP-ribose)polymerase,cleaved PARP]以及与炎症性肠病发生密切相关的信号通路p38有丝分裂原活化的蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)的表达情况,免疫组化检测VPS4B的分布情况,免疫荧光双标检测VPS4B与active caspase-3的共定位情况.结果:(1)免疫组化结果显示,VPS4B在CD患者肠黏膜中的表达明显高于正常对照组,主要定位在肠上皮细胞.(2)在TNBS诱导的结肠炎小鼠模型中,VPS4B和active caspase-3、cleaved PARP、磷酸化的p38(phosphorylated p38,p-p38)的表达均升高,且与active caspase-3有共定位.结论:VPS4B在CD患者的肠黏膜组织中表达升高,通过调控p38 MAPK信号通路促进肠上皮细胞凋亡,可能是CD的重要病理机制之一.