Spastin基因突变对斑马鱼脊髓运动神经元的作用研究

目的:微管切割蛋白Spastin是遗传性痉挛性截瘫(hereditary spastic paraplegia,HSP)的主要致病基因,本文旨在探讨Spastin基因突变对运动神经系统的形态和功能的影响.方法:鉴定斑马鱼spast敲除突变体的纯合子和杂合子,检测包括野生型的3种基因型spast+/+、spast+/ZKO988a、spastZKO988a/ZKO988a斑马鱼在无刺激下、光刺激下及声音刺激下自由游泳的运动速率;激光共聚焦显微镜成像转基因spast敲除突变体斑马鱼3种基因型Tg(hb9:eGFP);spast+/+、Tg(hb9:eGFP);spast+/ZKO988a、Tg(hb9:eGFP);spastZKO988a/ZKO988a的脊髓运动神经元(Cap)形态差异.结果:突变体spast+/ZKO988a和spastZKO988a/ZKO988a斑马鱼的运动速率与野生型无差异;突变体Tg(hb9:eGFP);spast+/ZKO988a和Tg(hb9:eGFP);spastZKO988a/ZKO988a斑马鱼朝向腹侧的CaP脊髓运动神经元的轴突长度显著短于野生型的轴突长度.结论:Spastin M1蛋白缺失对斑马鱼的运动速率无显著改变,但导致CaP神经元轴突长度缩短.