IFN-α/STAT1/STAT3信号在急性期川崎病PB/Breg细胞分化失衡机制中的作用及意义

目的 探讨急性期川崎病(KD)患儿α-干扰素(IFN-α)/信号传导及转录活化因子1(STAT1)/信号传导及转录活化因子3(STAT3)信号改变及其在浆母细胞(PB)/调节性B细胞(Breg)分化失衡机制中的作用.方法 选取2019年3月至2020年10月深圳市儿童医院接收诊治的38例KD患儿为研究对象,分别于静脉输注丙种球蛋白(IVIG)前(KD组)、后(KDIVIG组)直接取血备检,并根据心脏超声结果将KD组患儿分为合并冠状动脉损伤组(CAL亚组)和无冠状动脉损伤组(NCAL亚组),28例同年龄健康儿童作为对照组(Ctrl组).采用流式细胞术检测外周血CD19+CD24-CD38hiPB、CD19+CD24+CD38hiBreg细胞比例及CD19+B细胞白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)、细胞分化抗原40(CD40)、磷酸化的STAT1(pSTAT1)、磷酸化的STAT3(pSTAT3)表达水平;实时荧光定量PCR检测CD19+B细胞B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1)、干扰素调节因子4(IRF-4)、α/β-干扰素受体亚基1(IFNAR1)、α/β-干扰素受体亚基2(IFNAR2)、肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)、细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)、细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)mRNA表达;ELISA检测外周血浆IFN-α浓度.采用Pearson相关性分析SOCS1与pSTAT1、SOCS3与pSTAT3表达水平之间的相关性.结果(1)与Ctrl组相比,KD组外周血PB细胞比例及转录因子Blimp-1、IRF4表达水平显著增高,Breg细胞比例及IL-10表达水平明显降低,其中CAL亚组前三项指标高于NCAL亚组、后二项指标低于NCAL亚组,差异均有统计学意义(P<0.05).经IVIG治疗后,KDIVIG组PB细胞比例及Blimp-1、IRF4表达水平低于KD组,Breg细胞比例及IL-10表达水平高于KD组,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)KD组血浆IFN-α浓度、CD19+B细胞表面受体CD40、IFNAR1、IFNAR2及下游信号相关分子TRAF3、pSTAT1、IL-6、TNF-α表达水平明显高于Ctrl组,pSTAT3表达水平低于Ctrl组,其中CAL亚组前八项指标高于NCAL亚组、pSTAT3表达水平低于NCAL亚组,差异均有统计学意义(P<0.05).经IVIG治疗后,KDIVIG组血浆IFN-α浓度及CD19+B细胞CD40、IFNAR1、IFNAR2、TRAF3、pSTAT1、IL-6、TNF-α表达水平低于KD组,pSTAT3表达水平高于KD组,差异均有统计学意义(P<0.05).(3)与Ctrl组相比,KD组外周血B细胞SOCS1、SOCS3表达水平显著增高,其中CAL亚组SOCS3表达高于NCAL亚组、SOCS1表达低于NCAL亚组,差异均有统计学意义(P<0.05).经IVIG治疗后,KDIVIG组外周血B细胞SOCS1、SOCS3表达水平低于KD组,差异均有统计学意义(P<0.05).Pearson相关分析显示,KD组SOCS1与pSTAT1表达、SOCS3与pSTAT3表达均呈负相关(r=0.67、0.52,P<0.05).结论 IFN-α/STAT1/STAT3信号异常可能是急性期KD患儿PB/Breg细胞分化失衡的重要原因.