环状RNAcirc-ccnb1通过抑制细胞周期蛋白核转位对食管鳞癌增殖和迁移的影响

目的 探讨环状RNA circ-ccnb1对细胞周期蛋白(cyclinb1、ccnb1)的作用,以及对食管鳞癌增殖和迁移的影响.方法 ①收集60例食管鳞癌组织及癌旁正常组织标本,按癌组织及正常组织分为两组,通过免疫组化检测两组组织中ccnb1的表达,并分析食管鳞癌中ccnb1表达与临床病理因素(淋巴结转移、病理分期)之间的相关性.②培养食管鳞癌细胞,并分为两组:正常食管上皮细胞(Het1-A)和食管鳞癌细胞109(EC109).采用蛋白免疫印迹法(WB)检测两组中ccnb1蛋白的表达.③用携带circ-ccnb1的质粒转染EC109,检测其中ccnb1的核转位情况,将细胞分为3组:未转染组(Blank组)、转染空载体组(Vector组)及转染circ-ccnb1组(cir-ccnb1组).转染成功后进行核桨分离,采用WB检测转移至胞核内的ccnb1蛋白量的变化,细胞增殖实验(CCK-8法)及划痕实验检测细胞增殖率、迁移率.结果 食管鳞癌组织中ccnb1蛋白的表达高于正常组织,EC109细胞中ccnb1蛋白的表达高于Het1-A细胞(均P＜0.05).与Blank组相比,cir-ccnb1组细胞中ccnb1蛋白的核转位水平明显降低,细胞增值率、迁移率降低(均P＜0.05).结论 cir-ccnb1可以通过抑制ccnb1在食管鳞癌细胞中的核转位进而影响食管鳞癌的发展,即抑制癌细胞增殖和迁移.