沙利度胺对重型β地中海贫血患者红系细胞γ珠蛋白基因表达及分化的作用研究

目的:探讨沙利度胺对重型β地中海贫血患者体外红系细胞γ珠蛋白基因(HBG)表达及分化的作用及相关调控机制.方法:以沙利度胺为实验组、羟基脲为阳性对照组、等体积溶剂二甲基亚砜(DMSO)为阴性对照组,分别作用于体外培养的重型β地中海贫血患者红系细胞.采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测HBG及参与调控HBG的转录因子的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测γ珠蛋白的表达量;流式细胞仪检测各组细胞在分化不同阶段的成熟情况.结果:与DMSO组比较,沙利度胺组γ珠蛋白转录和翻译水平在分化第7天时逐渐增加(P＜0.05);在分化末期,沙利度胺组细胞表面分化标记物表达下降(P＜0.05);在分化过程中,调控珠蛋白转换的转录因子BCL11A在转录和翻译水平都降低(P＜0.05);KLF1、GA-TA1在分化第7、第21天转录水平下降(P＜0.05).SOX6与TALI在分化末期均下降(P＜0.05).结论:沙利度胺能提升体外重型β地中海贫血患者红系细胞γ珠蛋白转录及翻译水平,BCL11A、KLF1、GATA1等转录因子可能参与沙利度胺调控γ珠蛋白表达的过程,同时在分化末期,沙利度胺可能通过下调SOX6与TALI减缓红系的分化,增加未成熟红细胞的增殖,调节血红蛋白转录,从而有效诱导γ珠蛋白.