Gpr183基因敲除小鼠的构建及其在急性肝损伤中功能初步分析

目的 利用成簇的规律间隔短回文重复序列和相关蛋白9(CRISPR/Cas9)基因编辑技术构建Gpr183全基因敲除小鼠模型,并对Gpr183受体在淋巴细胞的调控功能和在急性肝损伤过程中的作用进行了初步分析.方法 根据CRISPR/Cas9基因编辑技术实验方法构建Gpr183全基因敲除纯合子F2代小鼠,随后通过Western blot方法检测野生型和敲除型小鼠肝脏和脾脏组织Gpr183基因蛋白表达水平,并通过免疫荧光(IF)技术分析了野生型和敲除型小鼠脾脏淋巴细胞的分布情况以及IL-17和IL-22的表达水平,最后我们对Gpr183受体敲除后在小鼠急性肝损伤模型中进行了初步分析?.结果 Gpr 183基因敲除小鼠可正常生长繁殖,F2代纯合子小鼠(KO)较野生小鼠(WT)相比基因片段部分缺失,同时Western blot结果显示KO小鼠肝脏、脾脏组织中Gpr183基因表达蛋白缺失,IF结果显示Gpr183受体可引起小鼠脾脏B淋巴细胞由滤泡中央区向滤泡边缘区迁移,并且减弱了脾脏淋巴细胞IL-17和IL-22的分泌功能(P＜0.05),同时在小鼠急性肝损伤诱导模型中,我们发现Gpr183受体敲除小鼠能明显缓解小鼠急性肝损伤过程(P＜0.01),差异具有统计学意义.结论 成功构建了Gpr183受体敲除小鼠模型,为Gpr183基因功能在体内研究提供了稳定的小鼠敲除模型,同时Gpr183受体敲除后能减轻小鼠急性肝损伤.