基于囊泡谷氨酸转运子2功能的多阶段诱导大鼠脂肪干细胞向胰岛素分泌细胞转化情况

目的 检测胰岛素和囊泡谷氨酸转运子2(VGLUT2)的表达,鉴定多阶段诱导大鼠脂肪干细胞(ADSCs)向胰岛素分泌细胞分化的情况.方法 从SD雄性大鼠脂肪组织中分离ADSCs并诱导其分化为胰岛素分泌细胞,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测第1～18天细胞上清液中胰岛素和C肽水平;用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法及蛋白质印迹法检测第1,2,13,18天时VGLUT2 mRNA和蛋白水平.结果 成功分离大鼠ADSCs细胞,胰岛素在第1,13和18天的水平分别为(15.12±3.21),(34.52±5.19)和(18.17±4.54)mU·L-1;C肽在第1,13和18天的水平分别为(374.68±79.52),(576.18±113.29)和(341.58±97.39)pg·mL-1,VGLUT2 mRNA在第1和18天水平分别为1.61±0.49和0.72±0.29;VGLUT2蛋白在第1及18天水平分别为0.05±0.01和0.06±0.02.结论 成功分离大鼠ADSCs,通过多阶段诱导为胰岛素分泌细胞.