钙敏感受体对高糖诱导的肾动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨钙敏感受体(CaSR)对高糖诱导的肾动脉平滑肌细胞增殖的影响,并分析其与细胞外调节蛋白激酶1,2(ERK1,2)信号通路的相关性.方法 将对数生长期的肾动脉平滑肌细胞随机分为4组:正常组、模型组、干预-1组、干预-2组及干预-3组.干预-1组、干预-2组和干预-3组分别加入GdCl3(钙敏感受体激动剂)30μmol·L-1、NPS2143(钙敏感受体抑制剂)10μmol·L-1和PD98059(细胞外调节蛋白激酶1/2抑制剂)10μmol·L-1+GdCl330μmol·L-1,均干预4 h后造模.用含葡萄糖25 mmol·L-1、胰岛素1μmol·L-1的DMEM培养细胞24 h来制备胰岛素抵抗模型.用蛋白质印迹法检测CaSR、增殖细胞核抗原(PCNA)和磷酸化细胞外调节蛋白激酶1,2(p-ERK1,2)蛋白的表达(灰度值),用流式细胞技术检测细胞增殖指数.结果 正常组、模型组、干预-1组、干预-2组及干预-3组的CaSR蛋白表达量分别为0.25±0.02,0.41±0.02,0.55±0.03,0.31±0.04和0.53±0.04;这5组的PCNA蛋白的表达分别为0.26±0.03,0.58±0.04,0.81±0.04,0.48±0.02和0.52±0.06;这5组的p-ERK1蛋白表达分别为0.48±0.02,0.81±0.04,0.92±0.05,0.37±0.03和0.72±0.06;p-ERK2蛋白表达分别为0.41±0.03,0.78±0.05,0.89±0.04,0.42±0.03和0.63±0.06;这5组的细胞增殖指数分别为13.52±2.12,20.72±2.96,35.41±3.23,16.98±2.36和19.72±2.28.上述指标:模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);干预-1组、干预-2组与模型组比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05);干预-1组与干预-3组比较(CaSR除外),差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 高糖活化的钙敏感受体促进肾动脉平滑肌细胞增殖,其机制与E RK信号通路激活密切相关.