圣草酚对β-淀粉样蛋白损伤PC12细胞的保护作用机制研究

The Chinese Journal of Clinical Pharmacology(2021)

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摘要
目的 基于雌激素受体-p38/丝裂原活化激酶(ER-p38/MAPK)信号通路探讨圣草酚对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导损伤肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的保护作用机制.方法 β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)诱导PC12细胞作为阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的细胞模型.实验分为空白组(C组)、Aβ25-35组(M组)、雌二醇E2+Aβ25-35组(Y组)、圣草酚+Aβ25-35组(G组)、圣草酚+Aβ25-35+ICI182780组(Y1组)、圣草酚+Aβ25-35+SB203580组(Y2组).用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;以蛋白质印迹(Western Blot,WB)法检测雌激素受体β(ERβ)、p-p38/p38、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、胱天蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达水平.进一步给予ER阻断剂ICI182780、p38/MAPK阻断剂SB203580检测细胞变化.结果 C组、M组、Y组、G组、Y1组、Y2组的细胞增殖率分别为100.00%,78.00%,96.00%,94.00%,80.00%,82.00%.圣草酚和ICI182780的实验中,C组、M组、Y组、G组、Y1组的ERβ蛋白表达量分别为0.32±0.02,0.10±0.02,0.32±0.02,0.27±0.02,0.21±0.01;p-p38/p38蛋白表达量分别为0.64±0.10,1.12±0.07,0.75±0.05,0.81±0.07,0.90±0.08;Bcl-2蛋白表达量分别为1.20±0.05,0.57±0.05,1.03±0.04,0.92±0.03,0.81±0.02;caspase-3蛋白表达量分别为0.52±0.03,1.31±0.07,0.72±0.04,0.75±0.02,0.86±0.04.圣草酚和SB203580的实验中,C组、M组、Y组、G组、Y2组的p-p38/p38蛋白表达量分别为1.13±0.09,2.15±0.07,1.46±0.05,1.51±0.07,1.86±0.08;Bcl-2蛋白表达量分别为0.28±0.02,0.15±0.02,0.26±0.04,0.24±0.02,0.20±0.01;caspase-3蛋白表达量分别为0.34±0.03,0.81±0.04,0.34±0.02,0.38±0.02,0.43±0.04.上述指标,M组与C组相比,G、Y组与M组相比(P<0.01),Y1、Y2组与G组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 圣草酚可发挥雌激素样作用,与ER结合激活P38/MAPK通路,对Aβ25-35诱导损伤的PC12细胞起保护作用.
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