猪盖他病毒IgG抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立一种快速检测猪群中盖他病毒的血清学检测方法,本研究以猪盖他病毒Cap基因的原核表达蛋白为包被抗原,羊抗猪IgG-HRP为二抗,通过优化反应条件,建立了猪盖他病毒IgG抗体间接ELISA检测方法.利用矩阵法对检测条件进行优化,最终确定Cap蛋白最佳包被浓度为2μg/mL,被检血清的最佳稀释倍数为100倍.试验结果表明,该方法特异性、敏感性、重复性良好;利用该方法和间接免疫荧光(IFA)同时对119份临床样品检测,结果显示两种检测方法的检测结果总符合率为97.5％.本研究建立的检测方法能够用于检测并评价血清中的GETV的特异性抗体的水平,在临床血清流行病学调查和疫苗免疫效果评价方面具有广泛应用前景.