ST细胞全悬浮培养的驯化及其培养伪狂犬病毒的工艺研究

将Siat7 e基因转染ST细胞,筛选,驯化得到一株可悬浮培养的ST细胞株,此株细胞能够稳定连续传代,适应无血清、高密度培养,最高密度可达6×106/mL,从摇瓶放大至生物反应器,生长稳定;采用驯化的全悬浮ST细胞培养伪狂犬病毒,从接毒时细胞密度、接毒量、收获时间三个方面优化了伪狂犬病毒的培养参数,确定接毒时细胞密度为2.0×106/mL～3.0×106/mL,接毒量为0.1 MOI～1 MOI,收毒时间为接毒后24 h～36 h.经过50 L生物反应器3个批次的工艺验证,培养的病毒含量均不低于109.0 TCID50/mL,说明驯化的ST全悬浮细胞适合伪狂犬病毒的培养.