高效液相色谱法测定食品中维生素K1和维生素K2的含量

建立高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)测定食品中维生素K,和维生素K2含量的分析方法.方法:配方奶粉、酸奶、纳豆冻干粉和鸡胗冻干粉经酶解、异丙醇分散、正己烷萃取、旋转蒸发复溶后,使用Thermo AcclaimTM 120 C18色谱柱(150 mm x4.6 mm,5 μm)分离,锌粉还原柱(50 mm x4.6 mm)衍生,以900 mL甲醇:100 mL四氢呋喃(含冰醋酸0.3 mL,氯化锌1.5 g,无水乙酸钠0.5 g)为流动相,激发波长为243 nm,发射波长为430 nm,分离维生素K1(Vitamin K1,VK1)、四烯甲萘醌(menaquinone-4,MK-4)、七烯甲萘醌(menaquinone-7,MK-7)和九烯甲萘醌(menaquinone-9,MK-9).结果:VK1、MK-4、MK-7和MK-9在20～1000 pg/L范围内与峰面积有良好线性关系.配方奶粉、酸奶、纳豆冻干粉和鸡胗冻干粉中VK1、MK-4、MK-7、MK-9含量的相对标准偏差(RSD)均小于5％,表明精密度好.配方奶粉、酸奶和纳豆冻干粉不同水平加标回收率分别为85.0％～107.8％、85.8％～109.6％、85.1％～102.7％,回收率的RSD均小于5％,表明回收率高,相对标准偏差小.结论:实验建立的方法重复性好、准确度高,可以精准定量食品中维生素K,和维生素K2的含量.