miR-25通过靶向BCL2L11在脓毒症致AKI细胞模型中发挥保护性作用

目的 研究微小RNA(microRNA,miR)-25对脂多糖(LPS)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)增殖、凋亡和炎症的影响及作用机制.方法 用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理HK-2细胞建立脓毒症致AKI的体外细胞模型,检测miR-25的表达水平.分别转染miR-25模拟物(mimic)及抑制剂(inhibitor),观察LPS诱导HK-2细胞损伤时,miR-25对细胞活性、炎症反应和凋亡的作用.双荧光素酶报告系统检测miR-25和BCL2L11的靶向关系,并通过将BCL2L11过表达质粒和miR-25 mimic共转染后进行LPS诱导处理,验证BCL2L11对miR-25减轻LPS诱导HK-2细胞损伤的逆转作用.结果 实验发现经LPS诱导HK-2细胞中miR-25表达水平下调(P＜0.05);过表达miR-25可提高LPS刺激后HK-2细胞的活性(P＜0.05),降低凋亡因子Bax的表达(P＜0.05),抑制剪切的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)和cleaved Caspase-9的活化(P＜0.05),并可上调BCL-2抗凋亡蛋白的表达,另外还可减少炎性细胞因子的表达(P＜0.05).此外,荧光素酶报告基因检测发现BCL2L11是miR-25 的直接作用靶点,即BCL2L11的表达受miR-25的负调控(P＜0.05),另外BCL2L11可逆转miR-25对LPS刺激HK-2细胞炎症和凋亡的抑制作用(P＜0.05);结论 本研究揭示miR-25可能通过靶向BCL2L11在LPS诱导的HK-2细胞中发挥抗炎和抗凋亡作用.